Texte de l'animation

Nous avons vu précédemment qu’en étudiant au niveau cinétique, une réaction équilibrée, même si vous souhaitez mesurer uniquement une seule des deux constantes de vitesse , soit k1 soit k-1, vous ne pouvez pas empêcher, dans ce schéma, la réaction inverse d'intervenir dans votre expérience. Enfin presque jamais, et c'est ce que nous allons voir dans ce modèle. Considérons une réaction équilibrée de ce type. Il peut s’agir, par exemple de la liaison d’une hormone sur son récepteur pour former le complexe qui est en fait responsable de l’effet hormonal, c’est-à-dire que c’est ce complexe qui permet le déclanchement de la réponse cellulaire. Si, expérimentalement, il n'est guère possible de "bloquer" k-1 afin de mesurer seulement k1 de façon indépendante, l'inverse n'est pas vrai. En effet, classiquement, dans les expériences de liaison de ligand à son récepteur, nous savons mesurer k-1 seule. Cette méthode classique est basée sur les techniques de radioactivité. L'expérience est réalisée ainsi : un ligand, A, est radio marqué, on le symbolisera par A étoile. On le met en grand excès en présence de son récepteur, B et on laisse incuber jusqu'à ce que l'équilibre soit atteint. Dans ces conditions, tous les sites récepteurs sont liés par A étoile : nous avons saturé tous les récepteurs en utilisant un grand excès de A étoile par rapport à B. Le mélange réactionnel est ensuite dilué brutalement en présence d'un grand excès de A froid, c'est-à-dire non radio marqué. Que se passe-t-il ? Rappelez-vous que la dissociation des complexes de type AB ne dépends que d'eux même, c'est à dire, en l'occurrence de la constante cinétique de dissociation, mais également dans le cas d'une réaction équilibrée, de la constante d'équilibre. En diluant notre mélange réactionnel, nous modifions le niveau d'équilibre : le complexe A étoile B va se dissocier pour se repositionner à un nouveau taux d'équilibre Si on n'ajoute rien d'autre, k1 se mettra en route et on retourne à la case départ. Mais nous avons mis un énorme excès de ligand froid. A ne va rien faire d'autre que de "piquer" le récepteur B libéré par A étoile, et former à son tour un complexe AB mais froid, non radio marqué. Par dosage radioactif, on ne verra que A étoile et A étoile B, pas AB : nous serons ainsi capables de mesurer la constante cinétique de dissociation du complexe. En combinant cette expérience avec une expérience de cinétique globale, dans laquelle nous obtiendrons la somme des constantes cinétiques élémentaires, nous obtiendrons k1 et k-1 individuellement