Texte de l'animation

Nous avons un récepteur, un ligand et une méthode pour mesurer la liaison donc la formation du complexe ligand-récepteur. Il faut maintenant s’assurer que la mesure se fera bien à l’équilibre. Pour cela, le récepteur est incubé avec une très grande concentration en ligand, puis la formation du complexe est quantifiée en fonction du temps d’incubation. Voici la courbe obtenue. Lorsque la concentration en ligand fixé reste constante avec le temps, l’équilibre est atteint. C’est l’expérience préliminaire à toute étude de liaison. Maintenant, le récepteur est incubé avec des concentrations variables, pendant un temps fixe pour que l’équilibre soit établit. On trace Lf en fonction de Lt ou éventuellement Ll. Dans le meilleur des cas, on obtient une saturation pour une très forte concentration en ligand. L’approximation du Kd est l’abscisse pour laquelle on obtient la demi-saturation. Il est préférable de tracer cette courbe en graphe semi logarithmique parce qu’on distingue mieux l’approche de la saturation. Mais, comme toujours, pour atteindre le Kd ainsi que le nombre de site récepteurs, il vaut mieux linéariser en traçant un graphe de Scatchard